台灣原生林分子鑑別技術之構建

本研究將利用穩定性較高的DNA分子標誌技術來鑑定屬內不同植物在DNA序列上的差異。設計特定引子擴增出ITS片段後將片段定序，將土肉桂與陰香、台灣肖楠與翠柏及烏心石與蘭嶼烏心石之ITS片段進行比較，就其兩者在ITS片段上的差異點，設計出特異性引子來進行兩者的片段擴增，藉此來觀察兩者電泳跑膠之條帶差異，鑑定其種類。預計採集台灣各地區天然分布之土肉桂與台灣肖楠及大陸陰香與翠柏之葉片材料，每樣株選取成熟、無病蟲害之樣本，脫水乾燥。將葉片樣本取適量置入磨缽研磨後，進行萃取，Genomic DNA之萃取。萃取完後利用分光光度計測定DNA濃度。以適當濃度之DNA template當作模板，進行PCR，並找出土肉桂與陰香及台灣肖楠與翠柏最佳之PCR條件及ITS引子(primer)，大量擴增ITS片段。將PCR擴增完成之產物進行電泳。完成後染色，並於暗房中以紫外光照相儀觀察條帶並拍照記錄。將電泳分離後之條帶，以滅菌之刀片切下所需片段膠塊，回收純化DNA，並進行定序。將所得到DNA分析序列與NCBI基因庫比對，確認PCR所擴增片段為所需之ITS片段，並就分析後所得之鹼基差異，設計能鑑別兩者之專一性引子(gene specific primer)。預期可以解決近年來因為大陸陰香與翠柏，及土肉桂與台灣肖楠在形態上類似判定不易，造成林農及林區誤種，釐清兩者間產生混淆的狀況。