台灣原生林分子鑑別技術之構建

本研究將利用穩定性較高的DNA分子標誌技術來鑑定屬內不同植物在DNA序列上的差異。設計特定引子擴增出ITS片段後將片段定序，將土肉桂與陰香及臺灣肖楠與翠柏之ITS片段進行比較，就其兩者在ITS片段上的差異點，設計出特異性引子來進行兩者的片段擴增，藉此來觀察兩者電泳跑膠之條帶差異，鑑定其種類。 樣本採集自臺灣各地區之臺灣土肉桂、臺灣肖楠、臺灣烏心石及蘭嶼烏心石，以及大陸陰香與翠柏之葉片材料，進行萃取Genomic DNA之萃取，利用能鑑別物種之專一性引子 (gene specific primer)，進行PCR檢測。藉著臺灣土肉桂及陰香鑑別引子ITS2-F、D4-R、BI-F及ITS2-R，檢體DNA之PCR產物電泳結果，藉由DNA分子量標記物質估算產物大小，如有產生286 bp者，即可判定為臺灣土肉桂及陰香所屬之樟屬植物；如有產生204 bp者，即可判定為外來種陰香；如有產生125 bp者，即可判定為臺灣土肉桂；利用臺灣肖楠及翠柏鑑別引子413-F、M875-R、F875-F及1038-R，如有產生626 bp者，即可判定為臺灣肖楠及翠柏所屬之肖楠屬植物；如有產生483 bp者，即可判定為外來種翠柏；如有產生183 bp者，即可判定為臺灣肖楠，並搭配葉綠體DNA trnL-trnF基因區間 (intergenic spacer, IGS) 做為驗證。 針對臺灣烏心石及蘭嶼烏心石兩種樹種進一步建立了三種分子標誌包括核糖體內轉錄第二區間之ITS2、與葉綠體非轉錄基因的trnL intron 及trnL-trnF IGS區域的DNA定序技術，初步研究結果發現分別有14個、0個及1個變異位點存在於ITS2、trnL intron 及trnL-trnF IGS區域。由於樣品數量限制，推論這些差異可能屬於個體變異，尚無法將變異與其族群及樹種的差異相關連。 預期可以解決近年來因為大陸陰香與翠柏，及臺灣土肉桂與臺灣肖楠在形態上類似判定不易，造成林農及林區誤種，釐清兩者間產生混淆的狀況。